نحوه تشخیص محتوای گینزنوزیدها

از نظر تحقیقات علمی ، روشهای استخراج جینزنوزیدها شامل استخراج آب ، استخراج الکل ، استخراج اولتراسونیک و غیره است. در میان آنها ، استخراج آب روشی نسبتاً ساده است. با توجه به روشهای عملیاتی استاندارد ، مقدار مناسبی از پودر جینسنگ را به آب ، گرما و جوش اضافه کرده و سپس عصاره آب حاصل را فیلتر کنید. سپس با جدایی و تصفیه بیشتر ، جینزنوزیدهای مورد نظر را می توان بدست آورد.

چگونه محتوای جینزنوزیدها را تشخیص دهیم؟ روش تشخیص معمول استفاده از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا است.
برای تشخیص جینزنوزیدها ، نه تنها با کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا بسیار آشنا نیست ، بلکه برای تسلط بر روشهای مربوطه نیز لازم است. هر مرحله از نگهداری تجهیزات ، تهیه نمونه ، اعتبار سنجی روش و در حال اجرا نمونه بر روی دستگاه تأثیر قابل توجهی در نتایج خواهد داشت. علاوه بر روشهای آزمایش معمولی و روشهای عملیاتی استاندارد ، برای تکمیل موفقیت آمیز آزمایش و به دست آوردن داده ها و نتایج دقیق نیز باید تجربه ای داشته باشید.

همانطور که همه ما می دانیم ، برای تشخیص محتوای جینزنوزیدها ، لازم است ابتدا یک راه حل استاندارد و حلال ، عمدتاً با استفاده از روش استاندارد داخلی تهیه شود. حل ، استخراج ، تصفیه نمونه و انجام تجزیه و تحلیل کروماتوگرافی همراه با راه حل استاندارد داخلی. ستون کروماتوگرافی ، دمای ستون ، سرعت جریان ، حلال ، روش برنامه را تعیین کنید و عملکرد را انجام دهید. بر اساس داده ها و سطح اوج به دست آمده از آشکارساز ، منحنی استاندارد و مقدار اوج نمونه را تعیین کرده و محتوای جینزنوزیدها را در نمونه محاسبه کنید. در صورت نیاز به تجزیه و تحلیل کیفی یا تشخیص دقیق تر جینزنوزیدها ، می توان از طیف سنجی کروماتوگرافی مایع استفاده کرد.

1 ، موارد آزمایش
انواع مختلفی از جینزنوزیدها وجود دارد ، و در حال حاضر بیش از 40 نوع جینزنوزید جدا شده و شناسایی شده اند ، که عمدتا به دو دسته تقسیم می شوند: نوع پروتوپاناکسادیول و نوع پروتوپاناکساتول. جینزنوزیدهای متداول شامل RB1 ، RB2 ، RC ، RD ، RE ، RF ، RG1 ، RG2 ، RH1 ، RH2 و غیره هستند. در میان آنها ، RB1 ، RB2 ، RC ، RD به عنوان چهار جینزنوزید اصلی جینسنگ شناخته می شوند. محتوای و نسبت این ساپونین ها در انواع مختلف و بخش های جینسنگ متفاوت است ، بنابراین موارد تشخیص نیاز به پوشش این اجزای اصلی ساپونین دارند.
2 ، دامنه تشخیص
دامنه تشخیص جینزنوزیدها گسترده است ، از جمله اما محدود به نمونه های زیر نیست:
جینسنگ هرب: ریزوم جینسنگ و سایر قطعات که مستقیماً از گیاهان استخراج می شوند.
محصولات جینسنگ: مانند پودر جینسنگ ، عصاره جینسنگ ، کپسول جینسنگ ، مایع خوراکی جینسنگ و غیره.
عصاره جینسنگ: یک ماده غلیظ سرشار از جینزنوزیدها که از طریق یک فرآیند خاص استخراج می شوند.
از نمونه های بیولوژیکی مانند خون ، ادرار ، بافت ها و غیره برای ارزیابی جذب ، توزیع و متابولیسم جینزنوزیدها در بدن استفاده می شود.
3 ، روش آزمایش
روشهای مختلفی برای تشخیص جینزنوزیدها وجود دارد ، از جمله کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) ، کروماتوگرافی لایه نازک (TLC) ، اسپکتروفتومتری قابل مشاهده ماوراء بنفش (UV VIS) ، طیف سنجی جرمی (LC-MS) و طیف سنجی مادون قرمز نزدیک (NIR). در زیر مقدمه مفصلی برای اصول و کاربردهای این روشها آورده شده است.
کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC)
HPLC در حال حاضر یکی از روشهای اصلی تشخیص جینزنوزیدها است که به دلیل راندمان جداسازی خوب و حساسیت بالا به طور گسترده مورد استفاده قرار می گیرد. این روش می تواند با استفاده از ستون های کروماتوگرافی مناسب و مراحل متحرک ، انواع مختلف جینزنوزیدها را از هم جدا و کمی تجزیه و تحلیل کند. در طی فرآیند آزمایش ، نمونه برای بهبود صحت نتایج اندازه گیری باید تحت درمان های استخراج و تصفیه خاصی قرار بگیرد.
مضرات:
هزینه تجهیزات زیاد است و عملکرد پیچیده است.
تکنسین های حرفه ای برای بهره برداری و نگهداری مورد نیاز هستند.

مزیت:
راندمان جدایی بالا و سرعت تجزیه و تحلیل سریع.
کاربرد گسترده ، تکرارپذیری خوب و ثبات.
این می تواند تعیین جامع تر و دقیق تر از محتوای جینزنوزیدها در نمونه را فراهم کند.
کروماتوگرافی لایه نازک (TLC)
TLC یک روش جداسازی میکرو با مزایایی مانند تجهیزات ساده و عملکرد آسان است. با آشکار کردن نمونه بر روی یک صفحه لایه نازک خاص ، اثر جداسازی جینزنوزیدها را می توان بصری مشاهده کرد و با نمونه های استاندارد مقایسه کرد. این روش معمولاً برای تجزیه و تحلیل اولیه و تشخیص کیفی جینزنوزیدها استفاده می شود.

مضرات:
تکرارپذیری و ثبات آزمایش ضعیف است.
زمان تشخیص نسبتاً طولانی است و حساسیت نسبتاً کم است.

مزیت:
کار آسان و کم هزینه.
مناسب برای غربالگری سریع جینزنوزیدها در نمونه ها.
طیف سنجی UV Vis
UV VIS یک تخمین اولیه از محتوای جینزنوزیدها با اندازه گیری میزان جذب نمونه است. با توجه به ویژگی های خاص جذب اشعه ماوراء بنفش جینزنوزیدها ، این روش ساده ، سریع و مناسب برای تجزیه و تحلیل غربالگری اولیه تعداد زیادی از نمونه ها است.
مضرات:
حساسیت و دقت نسبتاً کم است.
تداخل قابل توجه سایر اجزای موجود در نمونه.

مزیت:
کار آسان و کم هزینه.
مناسب برای تشخیص سریع و تجزیه و تحلیل غربالگری اولیه مقادیر زیادی از نمونه ها.
طیف سنجی جرمی (LC-MS)
LC-MS یک تکنیک تحلیلی است که ترکیبی از کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا با طیف سنجی جرمی است که نه تنها می تواند جینزنوزیدهای جداگانه را از هم جدا کند ، بلکه ساختار مولکولی و اطلاعات جرم آنها را نیز فراهم می کند. این روش از حساسیت و دقت بسیار بالایی برخوردار است و برای تشخیص اجزای ردیابی در نمونه های پیچیده مناسب است. این یک ابزار مهم برای تجزیه و تحلیل کمی از جینزنوزیدها است.

مضرات:
تجهیزات گران است و عملیات پیچیده است.
تکنسین های حرفه ای برای بهره برداری و نگهداری مورد نیاز هستند.

مزیت:
حساسیت و دقت بسیار بالایی.
می تواند ساختار مولکولی و اطلاعات انبوه را ارائه دهد.
مناسب برای تشخیص اجزای ردیابی در نمونه های پیچیده.
طیف سنجی مادون قرمز نزدیک (NIR)
NIR یک فناوری تشخیص نوری غیر مخرب ، سریع ، حساس ، دقیق و بدون تماس است که می تواند به طور مؤثر و سریع ساپونین ها را در جینسنگ تعیین کند. این روش نقش مهمی در تشخیص و ارزیابی کیفیت مواد فعال در طب سنتی چینی دارد.
مضرات:
وضعیت سطح نمونه تأثیر قابل توجهی دارد.
برای تجزیه و تحلیل مقایسه ای باید بانکهای اطلاعاتی مربوطه ایجاد شود.

مزیت:
آزمایش غیر مخرب بدون آسیب رساندن به نمونه.
سریع ، حساس و دقیق.
مناسب برای تجزیه و تحلیل سریع تعداد زیادی از نمونه ها.
4 ، ابزار تست
تشخیص جینزنوزیدها برای اطمینان از صحت و قابلیت اطمینان نتایج تشخیص ، نیاز به استفاده از ابزارهای تحلیلی با دقت بالا دارد. در اینجا برخی از ابزارهای آزمایشی متداول و ویژگی های آنها آورده شده است:
کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC)
HPLC یکی از اصلی ترین ابزارهای تشخیص جینزنوزیدها است ، با مزایایی مانند راندمان جدایی بالا ، سرعت تجزیه و تحلیل سریع ، تکرارپذیری خوب و ثبات. ابزارهای HPLC که معمولاً مورد استفاده قرار می گیرند شامل سیستم های فشار خون بالا کواترنر ، آشکارسازهای ماوراء بنفش و غیره ، همراه با ستون های کروماتوگرافی اختصاصی و مراحل متحرک ، می توانند به جداسازی مؤثر و تجزیه و تحلیل کمی از انواع مختلف جینزنوزیدها دست یابند.
کروماتوگرافی لایه نازک (TLC)
ابزارهای TLC عمدتاً برای تجزیه و تحلیل اولیه و تشخیص کیفی جینزنوزیدها استفاده می شوند. نمونه را از طریق یک صفحه لایه نازک خاص گسترش دهید ، اثر جداسازی را رعایت کرده و آن را با استاندارد مقایسه کنید. این روش به راحتی و مقرون به صرفه کار می کند ، اما تکرارپذیری و ثبات آزمایش ضعیف است.
طیف سنج UV VIS
ابزار UV VIS با اندازه گیری میزان جذب نمونه ، محتوای جینزنوزیدها را تخمین می زند. این روش برای تجزیه و تحلیل غربالگری اولیه تعداد زیادی از نمونه ها ساده ، سریع و مناسب است. ابزارهای UV VIS معمولاً مورد استفاده قرار می گیرند ، شامل اسپکتروفتومترها هستند که می توانند برآورد اولیه محتوای جینزنوزیدها در نمونه ها را بدست آورند.
طیف سنجی کروماتوگرافی مایع (LC-MS)
ابزار LC-MS توانایی جداسازی کروماتوگرافی مایع را برای ترکیبات نقطه جوش بالا با توانایی شناسایی قوی طیف سنجی جرمی ترکیب می کند و آن را به وسیله ای مؤثر برای جداسازی و تجزیه و تحلیل مخلوط های آلی پیچیده تبدیل می کند. این روش از حساسیت و دقت بسیار بالایی برخوردار است و برای تشخیص اجزای ردیابی در نمونه های پیچیده مناسب است. ابزارهای مشترک LC-MS شامل کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا و سیستم های طیف سنجی جرمی است که می توانند ساختار مولکولی و اطلاعات جرم را ارائه دهند.
طیف سنج مادون قرمز نزدیک (NIR)
NIR Instrument یک فناوری تشخیص نوری غیر مخرب ، سریع ، حساس ، دقیق و بدون تماس است. با اسکن طیف مادون قرمز نزدیک سطح نمونه ، می توان تجزیه و تحلیل کمی سریع ساپونین ها در جینسنگ حاصل شد. ابزارهای مشترک NIR شامل طیف سنجهای مادون قرمز نزدیک است که می توانند به تجزیه و تحلیل سریع تعداد زیادی از نمونه ها دست یابند.
5 ، نتیجه گیری
جینزنوزیدها ، به عنوان ماده اصلی فعال جینسنگ ، فعالیتهای فیزیولوژیکی مختلفی دارند و به طور گسترده در زمینه هایی مانند دارو ، محصولات بهداشتی و مواد آرایشی مورد استفاده قرار می گیرند.